蛋白质组的经典研究路线如下:
LCM-二维电泳·质道的技术路线是典型的一条蛋白质组学研究的技术路线,除此以外,LCM-抗体芯片也是一条重要的蛋白质组学研究的技术路线。即通过LCM技术获得感兴趣的细胞类型制备细胞蛋白质样品,蛋白质经荧光染料标记后和抗体芯片亲交,从而可以比两种样品蛋白质表达的异同。
Clontech最近开发了一张抗体芯片,可以对378种膜蛋白和胞浆蛋白进行分析。该芯片同时配合了抗体芯片的全部操作过程的重要试剂,包括蛋白质制备试剂,蛋白质的荧光染料标记试剂,标记体系的纯化试剂,杂交试剂等。
蛋白质组学的研究内容包括:
1.蛋白质鉴定:可以利用一维电泳和二维电泳并结合Westemn等技术,利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。
2.翻译后修饰:很多mRNA表达产生的蛋白质要经历翻译后修饰如湖化,糖基化,酶原激活等。翻泽后修饰是蛋白质调节功能的重要方式,因此对蛋白质翻译后修饰的研究对阐明蛋白质的功能具有重要作用。
3.蛋白质功能确定:如分析酶活性和确定酶底物,细胞因子的生物分析配基·受体结合分析。可以利用基因敲除和反义技术分析基因表达产物-蛋白质的能。另外对蛋白质表达出来后在细胞内的定位研究也在一定程度上有助于蛋白质功能的了解,Clotech的荧光蛋白表达系统就是研究蛋白质在细胞内定位的一个很好的工具。
4.对人类而言,蛋白质组学的研究最终要服务于人类的健康,主要指促进分子医学的发展,如寻找药物的把分子。很多药物本身就是蛋白质,而很务药物的靶分子也是蛋白质。药物也可以干预蛋白质-蛋白质相互作用。
在基础医学和疾病机理研究中,了解人不同发育、生长期和不同生理、病理条件下及不同细胞类型的基因表达的特点具有特别重要的意义。这些研究可能找到直接与特定生理或病理状态相关的分子,进一步为设计作用于特定靶分子的药物奠定基础。
蛋白质组的经典研究路线
蛋白质组的经典研究路线如下:LCM-二维电泳·质道的技术路线是典型的一条蛋白质组学研究的技术路线,除此以外,LCM-抗体芯片也是一条重要的蛋白质组学研究的技术路线。即通过LCM技术获得感兴趣的细胞类型制备细胞蛋白质样品,蛋白质经荧光染料标记后和抗体芯片亲交,从而可以比两种样品蛋白质表达的异同。Cl...
蛋白质组学研究的主要步骤
1、蛋白质样品的制备:蛋白质样品的制备是蛋白质组学研究的首要环节,也是最为重要的部分。蛋白质样品的质量直接影响到科学研究的真实性和可信度。2、蛋白质的分离:双向凝胶电泳技术是目前最基础和常用的蛋白质分离方法,它能将数千种蛋白质同时分离与展示的分离技术。双向电泳分为等电聚焦电泳和SDS-PAG...
什么是蛋白质组学的基本技术流程
蛋白质组学的基本技术流程主要为以下四方面:蛋白质标本的制备及分离:寻找较好的方法尽可能完全地抽提细胞或组织中的全部蛋白质是比较蛋白质组学研究的重要前提。蛋白质图像的差异对比分析:给予双向电泳所获得的凝胶图谱,可用图像分析软件进行分析对比。差异蛋白质肽段鉴定:图像分析显示的不相匹配点及有异...
蛋白质组的技术原理
双向凝胶电泳技术(2-DE)双向凝胶电泳技术与质谱技术是目前应用最为广泛的研究蛋白质组学的方法。双向凝胶电泳技术利用蛋白质的等电点和分子量差别将各种蛋白质区分开来。虽然二维凝胶电泳难以辨别低丰度蛋白,对操作要求也较高,但其通量高、分辨率和重复性好以及可与质谱联用的特点,使其成为目前最流行、...
蛋白质组学的研究策略是什么
蛋白质组学的研究策略主要包括如下:1、质谱法:通过测量蛋白质的质量来研究其特性,包括串联质谱技术(MS\/MS)用于确定蛋白质的氨基酸序列和翻译后修饰等信息。蛋白质互作网络分析:研究蛋白质间的相互作用,揭示蛋白质在细胞内不同通路中的相互作用和功能。2、自下而上的蛋白质组学策略:将蛋白质水解成...
蛋白质组学常用的研究方法
蛋白质相互作用的研究,酵母双杂交和噬菌体展示技术无疑是很好的研究方法。LCM-二维电泳-质谱的技术路线是典型的一条蛋白质组学研究的技术路线,除此以外,LCM-抗体芯片也是一条重要的蛋白质组学研究的技术路线。………详细资料请参考:on http:\/\/product.bio1000.com\/101969\/ ...
蛋白质组蛋白质组学的研究内容
随着研究的不断深入,蛋白质组学领域又涌现出新的研究方向,例如亚细胞蛋白质组学,它关注的是细胞内的不同亚结构单元的蛋白质组成,以及定量蛋白质组学,侧重于定量分析蛋白质的表达水平和变化。这些新方向进一步丰富了我们对蛋白质在生物体内复杂作用的理解,强化了蛋白质组学作为系统生物学核心研究方法的...
什么是蛋白质组学?简述二维电泳(2-DE)和质谱(MS)技术在蛋白质组学研究...
目前蛋白质组学研究在表达蛋白质组学方面研究的最为广泛,其分析通常有三个步骤:第一步、运用2-DE技术分离样品中的蛋白质;第二步、应用质谱技术或N末端测序鉴定2-DE分离的蛋白质;第三步、应用生物信息学技术存储、处理、比较获得的数据。(1)2-DE(Two-dimensional gel electrophoresis,双相凝胶...
蛋白质组学研究方法及应用前景是什么?
蛋白质组学研究的技术手段丰富多样,例如双向凝胶电泳,它能清晰地展示蛋白质的相对分子量和丰度。多维液相色谱(LC-MS\/MS)是质谱学技术的重要组成部分,用于精确测定蛋白质的结构和动态特性。此外,序列分析和结构分析对于理解蛋白质的功能至关重要。研究蛋白质之间的相互作用、修饰状态、定位和功能,是...
蛋白质组蛋白质组学研究中的主要技术
研究流程包括样品制备、等电聚焦、聚丙烯酰胺凝胶电泳、染色、蛋白点挖掘、酶切、质谱分析等步骤,以确定肽指纹图谱和氨基酸序列,最终通过数据库确定蛋白身份。Unlu等人提出的荧光差异显示双向电泳(F-2D-DIGE)方法改进了定量蛋白质组学分析,结合多重荧光标记,提高了结果的准确性和重复性。在DIGE技术中,...