转基因PCR检测不稳定,怎么办?

我正在筛选转基因阳性株,可是设计的特异性引物在做PCR时,今天能拉出,隔一天又拉不出,模板检测没问题,引物检测也没问题,酶其他人用了也没问题,恳请高人指教。

第1个回答  2007-04-01
肯定要做阳性和阴性对照的。
如果阳性和阴性对照结果没问题,那么在分析原因。本回答被提问者采纳
第2个回答  2007-03-29
通过引物设计、PCR扩增及凝胶纯化试剂盒回收,构建并获得耐热菌的PCR竞争模板;用获得的竞争模板作为定量内标物建立耐热菌的竞争定量PCR(QC-PCR)检测体系。
第3个回答  2007-04-09
如果绝大部分都拉的出来 是不是该考虑污染的问题
第4个回答  2007-03-29
哇,是科学家哦……我不知道哎,不然肯定告诉你的……
第5个回答  2007-03-30
不知道呀!!!!

为何我用转基因小鼠ai14做PCR会出现3条带
1、误差或污染:可能在试剂、处理样本、反应器等方面产生了误差或者污染,导致PCR反应中形成了不同大小的杂交产物。这种情况下可以尝试重新制备PCR试剂、DNA模板,并优化PCR反应体系和条件。2、异质性:由于转基因小鼠ai14具有多个插入位点,可能存在异质性。如果某个位点被扩增,将出现一个大小与野生型(WT...

我做转基因植物,最近一直做PCR鉴定,但只有引物二聚体,原因会有哪些?
最大的可能是转基因植物失败了,可能你转烟草成功了。当然也可能是你PCR了不同的基因,或者引物设计不同?或者上下游引物的同源性太高?我需要知道具体情形,才能更好分析

转基因植物PCR检测,扩增条带比预期目的条带要大,对PCR扩增产物测序,结...
可将DNA直接酶切看是否能切出你的目标片段 3.序列比对结果不能只看相似度,手工找一下看相同的序列出现在哪里怎么分布的,重复序列相似度高的话可能是零散的相似区域,很有可能P出的片段不是你想要的东西,最好换引物再试。若是有大段片段一致,则有可能在转基因过程中出现问题,片段没有完全转入 ...

转基因水稻PCR检测阳性,标记基因不表达,正常么
在鉴定阳性株的时候,最好把目的基因和标签基因一起扩增。如果基因组PCR鉴定没有问题,但目的基因不表达,就要确定载体构建是否正确。如果载体构建正确,多个株系都不表达,就说明目的基因在水稻中不能成功表达。当然,如果目的基因表达,融合的标签不表达,就说明标签连接不正确。

转基因检测的方法
PCR可以通过设计针对特定转基因片段的引物来扩增目标基因,从而判断样品中是否含有该转基因序列。环介导等温扩增(LAMP)则是一种快速、简单的核酸扩增技术,可以在恒定温度下对靶标DNA进行特异性扩增。此外,核酸生物传感器利用功能核酸如适配体或分子信标等识别转基因元件,并结合信号转换系统进行检测。在蛋白...

转基因为什么不能直接用PCR产物连接在表达载体上?
原因是首先如果是未知序列的话,需要用克隆载体来对这段序列进行测定,然后好确定序列中的酶切位点,为下一步表达载体的构建策略提供必要的信息。然后,即使是序列很确定的基因,一般也会先装在克隆载体上。主要是因为你没办法保证你的序列的重复性。如果直接用PCR产物的话,由于你的模板并不一定是完全...

怎么能检测出转基因
此外,一些国际组织和机构也会对转基因食品进行监控和评估,确保其安全性。公众可以通过关注这些组织的报告和声明,了解相关信息,以便做出明智的选择。在购买食品时,消费者还可以留意包装上的成分说明,了解产品是否含有转基因成分。虽然这些信息不一定全面,但至少能提供一些参考。总之,通过多种途径,消费者...

转基因的检测方法比较
目前常用的转基因检测方法有试纸条法、普通聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光定量PCR、恒温荧光PCR、数字PCR 试纸条:简单、快速,但对于深加工食品不适用 普通聚合酶链式反应(PCR):准确度较高,灵敏度高,价格低,缺点是专业性要求高,电泳的染料对人体有害,只能检测一个指标 实时荧光定量PCR:灵敏度...

谁能看懂这张转基因检测报告单,结果是转基因还是非转基因?
如果这些都是阴性的,就表明你的大豆样品中没有这些东西,基本可以认为这个大豆不是转基因的。但是不排除用的是其他一些系统进行的转基因,比如没有用上面说的三个片段,那么检测不出来就比较正常了。不过目前的转基因一般都会含有上述三个之一,所以你这个是非转基因的可能性还是很高的。

如何检验是否是转基因食品
可以根据相关的转基因DNA序列,设计特异性引物,进行PCR扩增检测。检测时要注意,有时可能有假阳性结果,最好对PCR扩增片段做一下测序,以便确认。

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