荧光定量数据处理时内参的CT值低于目的基因的CT值,那应该怎么进行处理啊...
你的概念弄错了。CT值只能在同样的基因之间比较。实验组的内参和对照组的内参比,实验组的目的基因和对照组的目的基因比。比如你实验组内参的CT值比对照组小一,那说明你实验组的加样量比对照组多了一倍。在计算目的基因的时候就要把实验组的目的基因的量除以二在和对照组比较。以此类推。
定量PCR目的基因与内参的Ct值差异大怎么解决
定量PCR目的基因与内参的Ct值差异大怎么解决 实时荧光定量 PCR技术用于检测插入的外源基因拷贝数 自 1994 年,第一例转基因植物产品 Flavr Savr TM 西红柿在美国上市,到 2003 年底,世界范围内转基因作物已遍布 18 个国家和地区,种植面积达 167.2 万英亩 (6770 万公顷 )( Ewen SWB,1999; 。
荧光定量PCR|为什么我的CT值异常?带你分析PCR实验Ct值
通过调整实验参数、优化PCR条件,或更换试剂和模板,通常能有效解决Ct值异常的问题,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右,而目的基因ct...
如果是正确的,说明你的目的基因表达量比内参高出一千倍啊。Ct值越大,表达量越低。
最近做荧光定量PCR实验,浓度梯度之间的CT值相差还不到1,这是什么原因...
1份模版变成2份,所以多一个Ct,就说明需要多扩增一个循环才能达到同样的荧光强度,模版量应该只有1\/2。也就是说理想状态下,2倍的梯度稀释应该产生Ct+1的递增。10倍的稀释就是Ct增加(以2为底的log10)。实际扩增中由于引物,模版量,杂质等的影响扩增效率可能达不到甚至超过100%。
求助关于荧光定量PCR的CT值问题
对照组基因A的CT值为20, 内参(比如βactin)CT值15。实验组基因A CT值18,内参CT值14。首先算加样量:delta CT=15-14=1。2的1次方是2。也就是说实验组的加样量是对照组的2倍。基因A: delta CT=20-18=2。2的2次方是4。也就是说基因A的量在实验组是对照组的4倍。但是由于加样量是2...
实时荧光绝对定量PCR实验数据分析哪个指标啊?
ct,是从基线到指数增长的拐点所对应的循环次数,仪器中给出的ct就是你每个孔实际的ct值 ct mean,是你相同样品的几个重复的CT值得平均值 如果是做的相对定量,用CTmean的结果就可以了,计算方法就是R=2-ΔΔCt,现在很多仪器你只要设置的时候明确标出内参基因和目的基因,这个结果也是会有自带软件给...
...的目的基因CT值非常相近,但是两组内参基因的CT值相差5左右,正常吗...
肯定不行的。荧光定量pcr通过以内参基因作为标准进行相对定量,即众所周知的2–ΔΔCT 法,(前提是要求在所有测试样本中恒定表达的已知参照基因,而且表达水平不受研究条件及处理方式的影响)。如果实验组和对照组的目的基因ct值非常接近(前提是cDNA稀释的倍数一致), 说明二者的目的基因无明显变化呀。4...
求解荧光定量PCR检测报告 检验项目 ct ct 值:∝ ct值标准:≥40 根据标 ...
3. 检测不到样本Ct值或Ct值为40,报告样本阴性。以上是判断样本阳性或阴性的标准。例如,你去医院检测自己是否患有乙肝。那么医生会抽取你的血液作为标本。首先要对你的血液样本进行处理,提取其中的核酸进行定量荧光PCR实验。如果你患有乙肝即血液当中存在乙肝病毒,你的血液样本中的乙肝核酸得到扩增,将...
荧光定量PCR(SYBR Green)详细操作步骤
数据分析 定义基线、阈值、Ct值和扩增曲线。使用熔解曲线判断特异性扩增。内参用于优先计算靶基因的相对表达量。相对定量关注样本间表达差异,采用ΔΔCt方法计算倍数差异。疑难解答 RNA得率低、RNA降解、Abs260\/Abs280比值低、DNA污染、下游反应中RNA表现不佳、熔解曲线有杂峰、无模板对照有扩增、Ct值过大...