请教:关于RNA的琼脂糖凝胶电泳

如题所述

第1个回答  2019-11-30
如果扩增的是质粒DNA果断是有区别的,因为质粒DNA会有三种构象,超螺旋(正常态),还有一种是线性的,一种是开环的,变性剂处理之后估计只有线性的了,跑出来地带肯定不一样
如果是普通的线性DNA,我觉得加变性剂后和原来的相比是不是电泳速度更快一些,因为它原本的双链解开了变成单链.
首先这个表述有问题,不是20KD,KD是描述蛋白分子量的,应该是DNA或者RNA片段20kb吧,
琼脂糖凝胶分离DNA片度大小范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至近50kb的DNA片段.
0.3%的琼脂糖凝胶,跑总DNA是可以,但要注意电泳时间,不能太长.
一个给定大小的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同.DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系.凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小.分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%,DNA片段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1.0%.
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