纳氏分光光度法测氨氮

Question

小弟学习用“纳氏分光光度法测氨氮”，但是遇到一些问题，希望能跟会做此实验的朋友们请教下。我的邮箱是fly32302008@163.com,可以通过邮箱联系我
由于实验的结果催的急，恳求大哥大姐们帮帮忙，谢谢
我今天做了一条标准曲线，请大哥帮忙看下是不是能用，有哪些问题，怎么去改正，怎么去评价曲线是不是正确的，麻烦了。。。。
选用的是HJ 535-2009，选用2号纳氏试剂（碘化汞-碘化钾-氢氧化钠）曲线方程如下：
y=0.0054x+0.0026 R2=0.9982

Answer 1

相关系数是R，不是R方，你的R=0.9991，不太理想。在环境监测的一般实验中，最好达到0.9995以上的相关系数。

不论曲线的相关系数达到几个9，都需要进行相应的质量控制，我建议你做一个标准样品，看看这条曲线做出来的能不能在范围内，如果可以，再做样品比较好。

Answer 2

标准里面说得很细的，仔细看看标准就好，注意细节。

Answer 3

1、纳氏试剂的配置要严格按照步骤进行，尤其注意顺序和冷却。若冷却时间不够长，可以放置过夜后再混合。因为冷却不到室温，可能引起纳氏试剂不稳定，显色不明显。
2、建议的纳氏试剂配方及配制方法如下：
a、称取16克氢氧化钠，溶于50mL水中，充分冷却至室温。
b、另称取7.5克碘化钾和10克碘化汞（HgI2）溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入冷却好的氢氧化钠溶液中，用水稀释到100mL。贮存于聚乙烯瓶中，密塞保存。
3、全程序空白试验的吸光度值要较低且稳定，特别要注意去离子水是否满足实验要求。

追问

我开始做的标准曲线中“零浓度标样的吸光度有0.16”，感觉太大了，不知道那的问题？请大哥帮忙解答下

追答

可能有几个方面：1、去离子水是否纯度不够，含有氨氮，抬高吸光度；
2、纳氏试剂配制过程没有充分冷却，或者有沉淀物，影响吸光度；
3、分光光度计有波动或比色皿透光率下降。

追问

我今天做了一个氨氮标准曲线，用HJ 535-2009方法做的，选用2号纳氏试剂（碘化汞-碘化钾-氢氧化钠），大哥帮忙看下能不能用，有哪些问题，怎么解决，怎么判定曲线是不是准确，谢谢。。。。

y=0.0054x+0.0026   R2=0.9982

追答

一、基本能用。
理由：1、线性（相关性）达到两个9；2、高浓度点吸光度下降不太严重；3、曲线的截距不太高。
二、改进方向：
1、争取线性（相关性）达到三个9；严格操作，杜绝干扰。
2、降低空白试验的吸光度值，尽量小于0.100；水、试剂和器皿三方面检查。

预祝实验顺利！