请教下大神，实时定量PCR（qpcr）实验，看扩增曲线的意义是什么？

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你好，扩增曲线可以粗略地判断扩增效率。SYBR Green的双delta Ct法要求目的基因和内参的扩增效率基本一致。如果不一致，需要对公式进行修正，部分qPCR仪的配套软件可以做到，直接输入每对引物的扩增效率。但无论如何，保证高扩增效率是实验成功的关键。如果扩增效率一致，不同Ct的曲线显示出来就基本是平行的位移，其倾斜程度基本一致。而如下图一样，一条比较“陡”，另一条比较“平”，那么意味着扩增效率不一致。有可能是引物效率不一，或者个别样品、反应孔存在抑制PCR的污染等。

来自：肽度时界威客吴博士，有科研难题、科研需求就上肽度时界吧！

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