生物化学的Tm是什么意思？

Answer 1

生物化学的“Tm”一般表示DNA熔解温度。

1、Tm值的定义：

Tm值就是DNA熔解温度，指把DNA的双螺旋结构热变性过程中紫外吸收值达到最大值的1/2时的温度。不同序列的DNA，Tm值不同。DNA中G－C含量越高，Tm值越高，成正比关系。

2、影响Tm值的因素：

①DNA碱基组成：C-G含量越多，Tm值越高；A-T含量越多，Tm值越低。

②溶液的离子强度：在低离子强度中，Tm较低，解链的温度范围较宽；在高离子强度中，Tm值较高，解链的温度范围较窄。

③PH值：当溶液的PH值在5~9范围内，Tm值变化不明显；当PH>11或PH<4时，Tm值变化明显。

④变性剂：各种变性剂主要是干扰碱基堆积力和氢键的形成而降低Tm值。

⑤DNA双链自身的长度。

3、Tm值计算方法：

Tm计算公式为：Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (%GC) – 600/size

公式中，Size = 引物长度。

4、Tm熔融温度：

熔融温度在溶液中通过绘制OD相对于温度来确定。 S形曲线的中间点是熔融温度。熔点的其他估计基于近邻分析（由Genosys5审查）已被确定为DNA3或RNA4。布雷斯劳尔，等[3]发现，熔化DNA双链的行为是其一级序列可预测的。