高效液相色谱的流动相如何选择?需考虑哪些因素?

如题所述

由于高效液相色谱中流动相是液体,它对组分有亲和力,并参与固定相对组分的竞争。因此,正确选择流动相直接影响组分的分离度。对流动相溶剂的要求是:
(1)溶剂对于待测样品,必须具有合适的极性和良好的选择性。
(2)溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器,应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长。所谓溶剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时,溶剂对此辐射产生强烈吸收,此时溶剂被看作是光学不透明的,它严重干扰组分的吸收测量。可以在网上搜索一下溶剂的紫外截止波长。
对于折光率检测器,要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相,以达最高灵敏度。
(3)高纯度。由于高效液相灵敏度高,对流动相溶剂的纯度也要求高。不纯的溶剂会引起基线不稳,或产生“伪峰”。痕量杂质的存在,将使截止波长值增加50~IOOnm。
(4)化学稳定性好。不能选与样品发生反应或聚合的溶剂。
(5)低粘度。若使用高粘度溶剂,势必增高压力,不利于分离。常用的低粘度溶剂有丙酮、乙醇、乙晴等。但粘度过于低的溶剂也不宜采用,例戊烷、乙醚等,它们易在色谱柱或检测器内形成气泡,影响分离.
温馨提示:内容为网友见解,仅供参考
第1个回答  2010-12-18
液相色谱仪,看你分离的样品的种类,看流动相是否和样品互溶,分离程度,一般加水多少,甲醇,乙腈很多种,看样品的沸点,溶解性
第2个回答  2010-12-15
水,乙腈,甲醇。考虑极性的组合

高效液相色谱的流动相如何选择?需考虑哪些因素?
(3)高纯度。由于高效液相灵敏度高,对流动相溶剂的纯度也要求高。不纯的溶剂会引起基线不稳,或产生“伪峰”。痕量杂质的存在,将使截止波长值增加50~IOOnm。(4)化学稳定性好。不能选与样品发生反应或聚合的溶剂。(5)低粘度。若使用高粘度溶剂,势必增高压力,不利于分离。常用的低粘度溶剂有...

高效液相色谱仪流动相选择应该遵循什么样的原则
②纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关,特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。③必须与检测器匹配。使用UV检测器时,所用流动相在检测波长下应没有吸收,或吸收很小。当使用示差折光检测器时,应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相,以提高灵敏度。④粘度要低(应<2cp)。高粘度溶剂会影...

高效液相色谱法的流动相是怎样的?
1、选用的溶剂应当与固定相互不相溶,并能保持色谱柱的稳定性。2、选用的溶剂应有高纯度,以防所含微量杂质在柱中积累,引起柱性能的改变。3、选用的溶剂性能应与所使用的检测器相匹配,如果使用紫外吸收检测器,就不能选用在检测波长下有紫外吸收的溶剂;若使用视差折光检测器,就不能用梯度洗脱。4...

高效液相色谱法( HPLC)的流动相如何选择?
高效液相色谱仪(HPLC)中流动相的选择涉及到多种因素,甲醇与水80:20的比例是一种常见的流动相组成,被广泛用于很多分析方法。这种比例的选择主要基于以下几个原因:溶解性能和极性调节:溶解性能:甲醇和水的混合物具有较好的溶解性,能够溶解多种化合物,尤其对于不同极性的化合物有良好的溶解性,使其...

高效液相色谱法流动相如何设置比例
2、流动相与样品不产生化学反应。3、流动相的黏度要尽量小,以便得到好的分离效果;降低柱压降,延长泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。4、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器,最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。5、流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡,...

高效液相时流动相怎么选择 浓度一般是多少
大部分的液相都是反相色谱柱(如C18,即十八烷基硅胶键合柱),大部分的反相色谱流动相都是水-甲醇或者乙腈-甲醇。有些物质易溶于水,有些物质易溶于甲醇和乙腈。比例要看物质的溶解程度,如,物质A用水-甲醇(90:10)溶剂中溶解,那么用水-甲醇(90:10)基本可以冲出来。物质B在水-甲醇(90:...

液相流动相的使用注意事项汇总,很实用!
液相色谱法的关键因素在于流动相的选择与使用,流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容、易于纯化及低毒性的特性。高效液相色谱中的流动相通常由水性溶剂、有机溶剂或两者混合而成。选择不同的配制方法会显著影响分析结果,尤其是保留时间。配制溶剂时,应按体积比(V\/V)或重量比(W\/W)进行,以确保混合...

高效液相色谱测右旋布洛芬流动相的选择
1>乙腈-磷酸二氢钾的好。因为布洛芬(无论是右选还是左旋)是一个有机酸,极性较大,分离极性较大的酸性物质一般采用酸性缓冲盐溶液。2>0.02mol\/L的乙腈-缓冲盐 (PH3.5 58:42)的配置方法如下:缓冲液配置:称取磷酸二氢钾13.61g(0.02mol)加水950ml溶解,加磷酸调PH至3.50,加水至1000...

高效液相色谱与气相色谱实验条件主要优化哪些因素?
高效液相色谱(HPLC):流动相的优化:选择合适的溶剂和溶剂混合比例,根据分析目标和样品性质选择最佳流动相。调节流动相的极性和离子强度,以实现目标化合物的分离。柱子选择与优化:根据目标分离化合物的性质(极性、分子量等)选择合适的柱子类型(正相、反相、离子交换柱等)。优化柱子的长度、直径和填料...

液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题
1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质...

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