如何选择转基因小鼠的报告基因
用LacZ可以进行胚胎全身染色(whole body staining),这样可以了解一个基因在体内的表达谱全貌。如果做细胞跟踪,比如免疫细胞,神经细胞等,一般喜欢用荧光蛋白。这样一是容易对细胞进行分离(比如FACS)和体外分析,二是容易对分离的细胞进行体内追踪(比如Adoptive transfer)。早些年用的最多的是EGFP和EYFP。有...
三转小鼠、ApoE 小鼠基因型介绍
此基因型对表型影响显著,纯合子的三转小鼠在四月龄开始表现出认知缺陷,六月龄时出现淀粉样β肽沉积,海马与皮层中可见神经纤维缠结,额叶皮层有老年斑。十二至十五月龄间,海马中可观察到构象改变与过度磷酸化的tau蛋白聚集。半合子与杂合子的转基因表型与纯合子相似,但半合子具体指X染色体上携带突变...
转基因小鼠亲代一定是纯合体的吗?
不,转基因小鼠亲代(F0代)不一定是纯合体的。纯合体意味着所有细胞都携带相同的转基因突变。然而,F0代小鼠作为转基因动物,通常是通过将外源基因导入受精卵或早期胚胎中来得到的。在F0代,转基因嵌入的外源基因可能只被部分细胞所接受并表达,而不是每个细胞都拥有。因此,F0代小鼠通常是体细胞异质体...
什么是转基因小鼠?
flox小鼠,全称为flank-LoxP小鼠,是另一种常用的转基因小鼠模型。它携带了一种特定的基因构建,该构建在其基因组中的特定位置插入了两个LoxP序列。LoxP序列是一种特定的DNA序列,可以与CRE重组酶相互作用。在CRE表达的组织或时间点,CRE重组酶识别和切割flox小鼠基因组中的LoxP序列,导致基因的重组,从而...
从小鼠新鲜肌肉组织中如何获得胰岛素基因,其基本的实验过程是怎样的
新生小鼠经过双引物PCR分析以鉴定F0和F1代小鼠的基因型。此外,通过RT-PCR和X-gal染色方法来观察小鼠组织中LacZ基因的表达,以及利用Western Blot(WB)技术来检测转基因小鼠与野生型小鼠之间目的蛋白表达的差异。实验结果显示,研究人员成功获得了含有目的基因的转基因阳性小鼠。RT-PCR分析进一步证实了LacZ...
【小鼠大学问】养小鼠你要知道的那些事(三):基因工程小鼠繁育方案
首先,转基因小鼠的繁育方案重点在于转基因阳性小鼠与野生型小鼠的交配(TG × WT)。通过受精卵显微注射,我们获得多个带有外源基因随机插入的首建鼠(Founder)。每个首建鼠的外源基因插入位置或次数不同,应独立建系繁育。从每个Founder鼠分别与野生型小鼠交配开始,通过鼠尾基因型鉴定保留阳性小鼠,再与...
转基因小鼠的繁殖筛选
纯合子转基因小鼠具有以下优点:(1)免除了复杂的、昂贵的检测;(2)能获得基因型完全一致的动物个体;(3)有利于动物的保种等。然而在转基因小鼠纯合子筛选过程中常常遇到以下问题:(1)纯合转基因鼠的筛选是单系传递,亲缘交配,这就带来一个很大的矛盾,即转基因在纯合过程中只能在同胞(全同胞或半...
为什么转基因小鼠在PCR反应中跑出三条带?
如果在鉴定转基因小鼠ai14的PCR反应中跑出了三条带,可能有以下原因:1、误差或污染:可能在试剂、处理样本、反应器等方面产生了误差或者污染,导致PCR反应中形成了不同大小的杂交产物。这种情况下可以尝试重新制备PCR试剂、DNA模板,并优化PCR反应体系和条件。2、异质性:由于转基因小鼠ai14具有多个插入...
在转基因鼠研究中,被研究的性状是鼠个体的什么
(1)生物体的形态特征、生理特征和行为方式叫做性状,因此在转基因鼠研究中,被研究的性状是鼠个体的大小,控制这个性状的基因是大鼠生长激素基因.该研究过程中,将大鼠生长激素基因吸入显微注射器中,在显微镜下将大鼠生长激素基因注入小鼠核尚未融合的受精卵内的卵细胞核中,因此这项先进的生物科学技术在...
转基因小鼠和基因敲入小鼠的区别
转基因小鼠和基因敲入小鼠区别在于基因方面的不同。基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展,除了...