细胞杀伤功能及活性检测方法

如题所述

细胞治疗药物和大分子药物研发中,细胞杀伤功能的评估至关重要。免疫系统中的多种细胞,如自然杀伤细胞(NK)、细胞毒性T细胞(CTL)和具有ADCC作用的细胞,都参与细胞免疫阶段的靶细胞杀伤过程。

关于检测方法,有几种常见手段:

首先,MTT还原法通过活细胞的代谢活性变化间接反映杀伤效果,操作简便,适合高通量实验,但可能受细胞状态影响,存在假阴性风险和微生物污染误判。

其次,LDH释放法通过测定细胞损伤导致的LDH外溢来评估活性,简单且通量高,但可能受细胞状态和自发释放的影响,产生假阳性。

报告基因转染法通过转染报告酶基因,直接测定细胞杀伤率,灵敏度高,但建立稳定细胞系耗时,对实验效率有所影响。

EUTDA细胞毒法利用荧光标记技术,灵敏且安全,能有效区分靶细胞的裂解,是Calcein的替代,适合ADCC检测。

流式细胞法如PE-mAb/FITC-Annexin V和DIOC18/PI标记法,能精确区分不同状态的细胞,但操作相对复杂,对操作技能要求高。

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细胞杀伤功能及活性检测方法
关于检测方法,有几种常见手段:首先,MTT还原法通过活细胞的代谢活性变化间接反映杀伤效果,操作简便,适合高通量实验,但可能受细胞状态影响,存在假阴性风险和微生物污染误判。其次,LDH释放法通过测定细胞损伤导致的LDH外溢来评估活性,简单且通量高,但可能受细胞状态和自发释放的影响,产生假阳性。报告基因...

如何检测细胞活力与细胞毒性?
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细胞活性和细胞毒性检测的实验方法?
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细胞活性的监测和评估是如何进行的?
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CCK-8细胞活性检测实验步骤
CCK-8细胞活性检测实验是一种常用的方法,用于评估细胞增殖、细胞毒性或生长抑制。以下是实验的详细步骤:一、实验准备 必备工具:酒精灯、移液枪、450nm波长的酶标仪、96孔培养板、CO2培养箱、CCK-8试剂、细胞计数板、PBS等。二、绘制标准曲线与细胞增殖检测 1. 从对数生长期的细胞悬液开始,制作并...

细胞活性检测方法及原理?
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自然杀伤细胞自然杀伤细胞活性测定
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细胞活性检测常用方法
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