如何确定及优化色谱条件？

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这个问题很大，不是一句两句就能解决的，因为一个方法的开发与优化是个系统性的工作，应该不断的尝试与改进。\x0d\x0a 就一般情况来说，你想确定合适的液相分析方法，应该首先搞清楚你检测的物质中都含哪些物质，根据它们的分子式及结构物性，物理化学性质来选择合适的分析条件。比如是否怕水，有无紫外吸收，分子量大小，极性大小，酸碱性等因素。从这些情况来判断你液相检测的可能条件。\x0d\x0a 然后，基本以上情况你分别判断出流动相的PKA（酸碱性），确定了流动相的PH（不确定就选中性），波长，色谱柱，流速，柱温。一般情况下你可以选择，乙腈：水，C18柱，25度柱温，1ml/min流速，以乙腈：水=90：10运行一针，看出峰情况，主要看最后一个峰是几分钟出来，然后再调整流动相比例，优化成所有的峰都能冲洗出来，还能进行分离，同时进行波长扫描，确定合适波长，等等。\x0d\x0a 最后跟据内、外标或归一化调整流动相等达到省时，快速检测、准确等目的。