STMT法提取DNA的详细资料

Question

越详细越好

Answer 1

STMT法提取全血DNA：

取含EDTA的抗凝全血300 μl，加入900 μl 5×STMT(按体积比1∶4灭菌双蒸水稀释)，温和混匀5~6次，冰浴10 min后，8 500 r／min离心30 s，弃上清。再加入300 μl 5 mol/L异硫精酸胍，温和振荡白色沉淀物后加入Rnase A 10 μl，室温放置10 min。加入800μl 4 mmol/L NaCLO4(PH5�2)和20 μl Resin(用时需充分混匀)，室温放置5 min，再次8 500 r／min离心30 s，弃上清。重复加入500 μl洗液混匀后，8 500 r／min离心30 s，弃上清两次。12 000 r／min离心60 s，吸干剩余液体，室温放置5 min，加入100 μl TE缓冲液，50 ℃保温10 min，12 000 r／min离心60 s，吸取上清，即为DNA。