我为什么最近提取真菌的基因组DNA总是提取不出

如题所述

真菌用溶菌酶没有,应该是用液氮或者石音沙研磨破壁
剂盒采用DNA吸附柱和新型独特的溶液系统,适合于从真菌组织细胞中快速简单地提取基因组DNA。可在30分钟内完成一个或多个100mg新鲜或20mg干燥的真菌样品DNA的纯化工作。提取过程不需要用到有毒的酚氯仿等有机物抽提,也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀,并能快速高效地去除多糖类、酚类和酶抑制物等杂质,纯化的DNA可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。
新鲜或干燥的真菌组织(细胞)磨碎后经裂解液裂解;蛋白质、多糖、细胞残片被沉淀去除;然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 进一步将多糖,多酚和细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在1小时内完成。
4.数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
温馨提示:内容为网友见解,仅供参考
无其他回答

为什么提得出RNA提不出DNA--昆虫
如果是,而且能排除操作因素的话(是不是用成了RNA提取试剂盒?沉淀步骤是否正确?),说明你的样品可能出现了明显的降解。DNA比RNA稳定的多,因此不会出现只有RNA没有DNA的情况,除非你刻意去提RNA。

真菌DNA提取不出来原因
这个试剂盒UltraClean™ Microbial DNA Isolation Kit,20min就能提取高效的真菌基因组DNA了 参考资料:http:\/\/www.anbiosci.com\/products\/12224.htm

真菌DNA的提取方法?详细
真菌DNA提取方法你可以参考植物的DNA提取的CTAB法,用那个方法同样可以提取真菌的DNA,原始材料就用滤纸吸干培养基的真菌菌丝体就可以。然后,因为真菌菌丝体里含有比一般植物要多的多糖成份,所以你需要在CTAB抽提液里面加入2%左右的PVP或者PVPP,来螯合多糖。如果对CTAB法不了解,你可以追问我。

关于真菌提取DNA,我想买百泰克的 植物DNA提取,不知道能不能行~
真菌的细胞成分和植物是有差别的,这种专一性的植物DNA提取试剂盒不一定能提好真菌的DNA。如果有条件你最好是买专一性的真菌DNA提取试剂盒。不过植物DNA提取的CTAB法确实可以适用于真菌的DNA提取,但因为真菌菌丝体含有很多多糖,你需要参考下植物DNA提取中除去多糖的方法。一般的话就是提高CTAB抽提液盐离子...

【求助\/交流】提取真菌DNA或RNA一定要液氮研磨吗?
直接CTAB,SDS之类的,水浴加热1.5h左右,好像也从环境中提出了真菌的DNA, 我是想直接提取,只不过设计引物的时候注意不要把植物的 ... 如果你只是做PCR的模板,那自然没问题。怕特异性不强的话,可以用巢扩。你就液氮一起上吧,最后就是总核酸。只要你是已知序列,引物设计好,用巢扩。

真菌dna做pcr条带总是很浅该怎么办?
我们这使用北京德曼特尔的快速无毒植物DNA提取试剂盒来提取真菌DNA,可以满足以上条件且快速无毒。其次是PCR Mix方面,我们这使用15-20微的体系,不同的PCR酶效果也可能不同,从而导致PCR效果不佳,我们这选用北京康为世纪或北京全式金的PCR Mix,都效果挺好的。另外是引物方面,如果引物设计的特异性差,...

提取基因组的方法
提取基因组DNA和细胞核DNA是不同的方法提取细胞核要先把细胞破碎分离出细胞核,要在甘油或其他保护剂中进行SDS十二烷基磺酸钠:可破坏细胞膜、核膜,并使组织蛋白与DNA分离CATB是一种抽提液,破坏细胞膜的~具体忘了~DNA不溶于异丙醇,异丙醇可以析出DNA,产生白色絮状沉淀,用枪头挑出就可以了以下是一些具体方法,希望有...

提真菌线粒体DNA中混有基因组DNA,怎样去除
提真菌线粒体DNA中混有基因组DNA,怎样去除 细胞核基因组(nuclear DNA,nDNA)与线粒体基因组(mitochondria DNA,mtDNA)之间存在着非常密切的关系。mtDNA转录、复制和翻译需要各种不同的核基因产物;而核基因产物表达的紊乱与mtDNA突变、线粒体蛋白质的生物合成等受到抑制均有关系。两者不但在其生物发生、...

提真菌DNA时需要缓冲液和裂解液,但我查不到如何配,就是具体加Tri-Hcl...
这是我提真菌DNA做ITS时用的提DNA方法:1M Tris-cl(PH 8.0)100 ml:12.11g Tris碱;ddH2O ,80ml;HCl,4.9 ml三者混匀充分溶解后,滴加浓盐酸调PH至8.0,定容至100ml;0.5M EDTA(PH 8.0) 100ml:在80ml水中加入18.01g EDTANa2.2H2O搅拌溶解,用NaOH调PH至8.0(约2gNaOH颗粒)...

真菌的DNA提取方法有哪些,要详细操作步骤
1.真菌菌丝0.5-1 g, 在液氮中迅速研磨成粉 2.加入3 mL 65℃预热的DNA提取缓冲液,快速振荡混匀65℃水浴30 min, 期间混匀2-3次 3.加入1 mL 5M KAc,冰浴20 min 4.等体积的氯仿:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000 rpm,4℃离心5 min)5.取上清,加入2\/3倍体积的-20℃预冷异丙醇, ...

相似回答