Sephadex葡聚糖凝胶柱使用注意事项
(7) 填料反复使用,每次使用完毕,一般可用甲醇将柱子洗净,然后使用下一次分离的起步溶剂替换甲醇,以便再次使用。Sephadex LH-20是由葡聚糖G-25羟丙基化加工而成,属于分子筛凝胶,尤其适用于天然产物在有机溶剂中的纯化。例如:类固醇、萜类、脂类以及小分子多肽等,Pharmadex LH-20同时适用于分子类别非...
交联葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶使用方法
在常温下,用0.2N HCl浸泡凝胶12小时,间隙搅拌后滤干,水洗至中性。将溶胀好的凝胶脱气(可采用真空抽滤或超声波)后,根据装柱要求一次性置入柱内。保持湿态装柱,避免柱内产生气泡或断层。上样前,平衡层析柱至少3-5个柱体积,直至记录仪基线平稳,流出液的pH值与上柱Buffer的pH值一致。凝胶过滤...
凝胶柱层析操作方法?
凝胶柱层析的使用方法大体有一下步骤:(1)预处理称取葡聚糖凝胶(有不同型号)若干克,加入洗脱剂(通常为甲醇或者水,这里以甲醇为例)约20倍凝胶量,置室温下3h进行溶胀,溶胀必须彻底,否则会使上柱后流速变慢,凝胶断裂等。(2)装柱凝胶层析柱的直径与柱长之比一般为1:15 (3)加样装好的...
如何用溶胶凝胶装柱?
装柱前要将色谱柱垂直固定在支架上。因为干的凝胶和用缓冲液平衡好的凝胶的体积差别很大,因此装柱前需要根据色谱柱的内体积计算所需要的凝胶量。实验一般使用的是交联葡聚糖凝胶 (Sephadex G-75)。“G”表示凝胶的交联程度,膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水7.5 g。凝胶...
葡聚糖凝胶层析填料染菌怎么办
葡聚糖凝胶层析填料染菌操作办法如下:1、毫升蒸溜水,搅拌均匀,在室泪溶胀6小时,或沸水浴溶胀2小时。2、将层析柱洗净,垂直固定在铁支架上,选择有薄汉端作为层析柱下口,将下口疑胶表面平齐时,关闭下端出口。3、用少量洗脱液清洗层析柱加样区,共洗涤三次,每次清洗液应*进入凝胶柱内后,再...
怎样用葡聚糖凝胶测定多糖分子量,有原理和过程。
常用的是凝胶滤过法。将充分膨胀好的SephadexG-200、G-150或G-75湿法装柱,用一定离子强度的氯化钠水溶液进行平衡,然后将各种不同的已知分子量的多糖分别相继上柱,同一离子强度的氯化钠水溶液洗脱,分步收集,苯酚-硫酸法监测,分别求得洗脱体积Ve,然后再将兰葡聚糖(MV>200万)上同一条柱,求出柱...
葡萄糖凝胶Sephadex-G200怎样使用
在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化; 8. 在位清洗(CIP) 凝胶使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm\/h用1M氢氧化钠反向洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。备注: 其它规格葡聚糖凝胶处理方法类似。
SephadexG-200柱层析是什么
有些产品建立用0.02%叠氮钠。 ⒌ 离子交换层析的应用 离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。 SephadexG-200食葡聚糖凝胶层析,G后面加一个数字,数字越小的介质交联度越大,分级范围越小,而数字越大的...
需要pH4.5的葡聚糖凝胶层析洗脱液应该用哪种?怎样配制?
1.凝胶的预处理 交联葡聚糖凝胶的市售商品多为干燥颗粒,使用前必须充分溶胀。方法是将欲使用的干凝胶缓慢地倾倒入5~10倍的去离子水中,参照相关资料中凝胶溶胀所需时间,进行充分浸泡,然后用倾倒法除去表面悬浮的小颗粒,并减压抽气排除凝胶悬液中的气泡,准备装柱。在许多情况下,也可采用加热煮沸...
炽灼残渣操作方法
首先,进行凝胶的浸泡。称取特定量的葡聚糖凝胶(右旋糖酐70用G-150,右旋糖酐40用G-100),加入适量的水,在水浴中加热5小时,期间需不断搅拌并更换凝胶上层液体,以去除杂质和过细的胶粒。其次,进行装柱。在柱A内先加满水,然后将充分泡胀的凝胶加入,加入的水体积约为凝胶容量的1\/4,搅拌均匀...