变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和非变性的有什么区别？

Question

如上

Answer 1

1、工作原理不同

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳或称为活性电泳是在不加入SDS和巯基乙醇等变性剂的条件下，对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是根据寡核苷酸的大小来分离，因此可将全长产物与不完整的短分子分开。

2、功能不同

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷，它们的分离是依据其电泳迁移率的不同和凝胶的分子筛作用，因而可以得到较高的分辨率。

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的蛋白质或多肽与SDS结合，经热变性和二硫键的还原，形成所带负电荷相对一致的非折叠衍生物，其泳动速度主要由分子量决定。

3、特点不同

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的过程中，蛋白质的迁移率不仅和蛋白质的等电点有关，还和蛋白质的分子量以及分子形状有关，其中蛋白质的等电点是最重要的影响因子，要根据蛋白质的等电点来选择对应的电泳缓冲系统。

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳电泳时通常每一泳道至少加1mg合成的寡核苷酸，电泳后在紫外灯下定位寡核苷酸条带，将长度正确的寡核苷酸从凝胶上切下。

参考资料来源：百度百科-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

参考资料来源：百度百科-非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

Answer 2

非变性凝胶里面没加变性剂，一般是SDS。非变性胶跑出来的蛋白能保持其活性一般用做功能试验，如EMSA。由于没有变性剂的原因非变性胶电泳时除了与蛋白分子量有关也会受都电荷的影响，因此对蛋白等电点的确定和缓冲液的酸碱性有注意，有时需要倒转电泳时的正负极。从跑的胶来看，变性胶会比较好看，带比较窄，非变性胶跑出来则比较粗糙。

Answer 3

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）是根据寡核苷酸的大小来分离，可将全长产物与不完整的短分子分开。变性后的片段所带电荷相对一致，其泳动速度只由分子量决定。
而在非变性凝胶中分离中取决于它所带的电荷和分子量的大小两个因素。所以变性凝胶分辨率更高。