怎样采集牛OP液

Answer 1

牛、羊食道-咽部分泌物(O-P液)样品的采集
1.1器材：金属探杯、灭菌广口瓶、采样箱、记号笔、标签、封口膜、一次性手套、口罩
1.2试剂：生理盐水、0.2%柠檬酸或2％氢氧化钠、细胞培养液（0.5%水解乳蛋白-Earle液）或磷酸盐缓冲液（0.04mol/L 、pH7.4），
2.1 样品采集
被检动物在采样前禁食(可饮水)12小时，以免反刍胃内容物严重污染O-P液。采样探杯在使用前经0.2％柠檬酸或2％氢氧化钠浸泡5分钟，再用自来水冲洗。每采完一头动物,探杯要重复进行消毒和清洗。采样时动物站立保定，将探杯随吞咽动作送入食道上部10～375px处，轻轻来回移动2～3次，然后将探杯拉出。如采集的O-P液被反刍胃内容物严重污染，要用生理盐水或自来水冲洗口腔后重新采样。
2 .2样品保存
将探杯采集到的8～10mL O-P液倒入25 mL以上的灭菌玻璃容器中, 容器中应事先加有8～10mL细胞培养液（0.5%水解乳蛋白-Earle液）或磷酸盐缓冲液（0.04mol/L 、pH7.4），加盖密封后充分摇匀，贴上防水标签,并写明样品编号、采集地点、动物种类、时间等，尽快放入装有冰块的冷藏箱内，然后转往-30℃冰箱冻存。通过病原检测，做出追溯性诊断。
附：试剂的配制
1.1 0.1mol/LPBS液：氯化钠80g,氯化钾2.0g,磷酸氢二钠30.0g,磷酸二氢钾2.0g,蒸馏水1000.0ml
0.04mol/L 、pH7.4磷酸盐缓冲液: 0.1mol/LPBS液400ml, 蒸馏水600ml
1.2 0.5%水解乳蛋白/Earle’: 氯化钠6.8g,氯化钾0.4g,氯化钙0.2g,硫酸镁0.2g，磷酸二氢钠0.14g,葡萄糖1.0g，10%酚红2.0g，水解乳蛋白5.0g,加双蒸馏水1000.0ml.按配方称取各成分并逐个溶解，最后加双蒸馏水1000ml，过滤除菌，或69kpa高压蒸汽灭菌15min.室温或4°C保存。

来自百度文库。