想用PCR扩增下面一段序列,从头到尾都要,PCR引物如何设计~~~

序列是 1 gtgagcagtg ggtgagcccg gtggatgagg accaagggct ctcatgagcc tggaggggtg
61 agggagtttt tggctactgg aatcacaggc ggtgccaggc ctgggtcaga attggaattc
121 tgctgggcag ggagtgggct ggagacgggc cagggctagg ttcttctttc tgcaggaccg
181 gggtggaacg agaggcagct gggggtggcc tgccactggg tttgggtctg gattaagtta
241 aacctaaggg tctggggttc tgtgggtggg gtgggcgagg gaggcagcgc agcatcaaga
301 tggggggctc ttccagggct ctgtgtgccc agtgtgtaac cctcaccttc ccctctggcc
361 atcaggaaaa ggccgctatg gcgaagtgtg gcggggcttg tggcacggtg agagtgtggc
421 cgtcaagatc ttctcctcga gggatgaaca gtcctggttc cgggagactg agatctataa
481 cacagtgttg ctcagacacg acaacatcct aggcaagggg agaggccagc tgtgccaggc
541 ctggggcttt gcccccctgc actcagggct caagtttgca gacctccaga cattaacaga
601 accctgaagg actctcagcc cacctgcagc atcaacctct ttttttaatt taatttaatt
661 taatttaatt taatttaatt taatttaatt tttgagacag ggcctcgctc tgtcacccag
721 gctgggatgc agtggtgcaa tctcactgga gcctcaatct cttgagctca agtgatcctc
781 ccacttcagc ctcttgagta gctgggacca caggcatgtg ccaccatgcc cagctaactt
841 ttttattttt tgtagagacg aggtctccct atgtttccca gactggtctc aaattcctag
901 gctcaagcag tgctcttgcc ttggcctccc aaagtgttgg gattacaggt gcaagccact
961 aagccaggcc cagacccaac ctctgactcc agctctgtct ctgacctaag ccacatcaac
1021 ccccaccccc agacctagct tagcagtgac ccagtccatt ccctctcccc caaccccacc
1081 ctgaccctga cgactccagc ctcccttagc cccagcccct tggctgagtc acccaacctt
1141 tctgcacaca ggcttcatcg cctcagacat gacctcccgc aactcgagca cgcagctgtg
1201 gctcatcacg cactaccacg agcacggctc cctctacgac tttctgcag

从头到尾都要,如何设计引物呀~~~

首先建议你学一下生物软件的应用,这对你有好处,因为早晚都要用。
primer premier 5.0可以帮你
先到NCBI网站找到此序列所在基因片段,然后在用软件clustalx编辑,再用primer premier 5.0将你找到的基因片段paste,进行查找引物,太长时间没弄过了有点忘了,要不就帮你弄好了
温馨提示:内容为网友见解,仅供参考
第1个回答  2009-12-25
引物与待扩增序列两端遵循碱基互补配对原则,引物长度不少于16个碱基,一般20-25个。
474115597我QQ。
第2个回答  2010-01-02
呃。。。。说来话长。。。。

pcr扩增的引物怎么设计
引物应设计在目标DNA序列的保守区域,以确保与目标DNA的特异性结合。同时,应避免与非目标DNA序列的互补配对,以减少非特异性扩增。5. 避免引物二聚体和发夹结构的形成:引物间不应存在互补配对,以避免形成引物二聚体。此外,引物自身也不应形成发夹结构,因为这可能降低引物的有效浓度,影响PCR效率。例如...

普通pcr引物如何设计
一、明确目标序列 需要首先明确要扩增的DNA序列,这是设计PCR引物的首要前提。这段序列应该是已知的,并且具有足够的信息用于设计特异性引物。二、选择引物设计软件 可以使用在线的引物设计工具或专业软件,如Primer Premier、Vector NTI等。这些工具能够帮助确定引物的位置、长度、GC含量等基本参数。三、确定...

pcr扩增中,如何设计引物?
1、引物5撇端可以修饰。引物3撇端不可修饰。引物3撇端要避开密码子的第3位。2、引物设计需要注意的地方很多,在大多数情况下,我们都是在知道已知模板序列时进行PCR扩增的。设计的目的是在两个目标间取得平衡:扩增特异性和扩增效率。3、PCR引物设计的11条黄金法则引物最好在模板cDNA的保守区内设计。...

PCR引物如何设计?
6. 序列特异性:引物设计完毕请使用 NCBI BLAST功能检索引物特异性,以避免非特异性扩增产生。注意: PCR的产量通常取决于PCR引物的3’端,引物间形成二聚体会降低扩增效率。

PCR的引物怎样设计,
PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列.因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否.要设计引物首先要找到DNA序列的保守区.同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构.如这个区域单链能形成二级结构,就要避开它.如这一段不能形成二级结构,那就可以在这一...

PCR的引物如何设计?
1、引物长度一般为15-30bp,常用的为18-27bp,但不能大于38bp;2、引物GC含量一般为40%-60%,以45-55%为宜,上下游引物GC含量和Tm值要保持接近;3、引物所对应的模板序列的Tm值最好在72℃左右,至少要在55-80℃之间,Tm值曲线以选取72度附近为佳,5'到 3’的下降形状也有利于引物与模板的...

如何进行pcr引物设计
PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。原则:引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。产物不能形成二级结构。引物长度一般在15到30碱基之间。G加C含量在百分之40到60之间。碱基要随机分布。引物自身不能有连续4...

PCR引物怎么设计?
2、 引物序列在模板内应当没有相似性较高,尤其是3’端相似性较高的序列,否则容易导致错配。引物3’端出现3个以上的连续碱基,如GGG或CCC,也会使错误引发机率增加。3、引物3’端的末位碱基对Taq酶的DNA合成效率有较大的影响。不同的末位碱基在错配位置导致不同的扩增效率,末位碱基为A的...

如何设计PCR引物?
设计PCR引物是一个细致的过程,下面是一个逐步指南:1. 首先,访问"NIH National Library of Medicine"的网站。2. 在搜索框中,选择“Gene”数据库,输入目标基因的英文名称,如“bcl2”。根据样本类型(如人或鼠)选择相应的物种,例如人类选择“human”。3. 点击目标基因的链接,查看其详细信息,包括...

如何设计引物
设计引物需要遵循一定的原则和步骤,以确保引物的特异性和有效性。首先,需要确定目标基因序列,并选择合适的引物设计软件或在线工具。然后,根据设计原则,选择合适的引物序列,并进行评估和优化。最后,通过实验验证引物的特异性和扩增效率。引物设计是PCR实验中的关键步骤,因此需要认真对待。在选择引物设计...

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