吉姆萨染色瑞特染色法

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吉姆萨染色法，也称为瑞特染色法，是一种经典的细胞染色技术，由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝（美蓝）组成。伊红是钠盐，与亚甲蓝结合后形成瑞特染料，呈憎液性胶体沉淀。染色过程中，细胞成分通过物理吸附和化学亲和作用，呈现出不同的色彩。

细胞成分因化学性质不同，对染料的亲和力各异。例如，血红蛋白和嗜酸性颗粒是碱性蛋白质，与伊红结合染成粉红色，而细胞核蛋白（嗜碱性）与淋巴细胞胞浆则与美蓝或天青结合，染成紫蓝色。中性颗粒由于等电状态，可与伊红和美蓝结合，呈现淡紫色。

染色效果受pH值影响显著。在偏酸性环境下，蛋白质带正电荷，易与伊红结合，染色偏红；在偏碱性环境下，负电荷增多，与美蓝结合，染色偏蓝。因此，染色过程对氢离子浓度要求严格，需使用清洁、无酸碱污染的环境。甲醇作为染液稀释剂，必须优质，染色过程需用缓冲液，冲洗水应保持近中性。

新鲜配制的染料偏碱性，需在室温或37℃下成熟，美蓝会逐渐转变为天青B，染色效果随着美蓝氧化的进程而优化。测定染料质量的指标是吸光度比值（rA），初始时接近2，随着美蓝氧化，rA会下降，当降至1.3±0.1时，染料可使用。储存时，需密封防止甲醇挥发和氧化成甲酸。有建议加入甘油以保持甲醇稳定，确保染色清晰。同时，甲醇需纯净，过多的丙酮会导致染色偏酸，影响白细胞的染色效果。

扩展资料

染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但该法对细胞核和寄生虫着色较好，结构显示更不清晰，而胞质和中性颗粒则着色较差。为兼顾二者之长，可用复合染色法。即以稀释吉姆萨液代替缓冲液，按瑞特染色法染10min.或先用瑞特染色法染色后，再用稀释吉姆萨复染。