【求助/交流】请教质粒线性化是指什么意思

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silicare(站内联系TA)转一个e.coli，看看长不长就ok了genewind(站内联系TA)线性化就是单酶切，然后整合到酵母的基因组！fungixx(站内联系TA)你可以同时做一个对照 使用你的酶之外的另一种容易切割的酶和这种酶进行双酶切，这样就能判断是否完全切割吧liu2007(站内联系TA)单酶切后，因为单酶切的质粒为线状构象，而没切开的质粒为环状，电泳能完全分开这两种构象，再回收线性化的条带用于转化就可以了。也可以取少许酶切样品检测，发现单酶切切得很完全，就可直接用此样品纯化后做转化。gundamba(站内联系TA)做个电泳就可以了，首先，线性化的质粒跑的比酶切之前的质粒慢，再者，线性化的质粒同MARKER比较，显示的是真实的大小，可以看你质粒大小来区分crab1983(站内联系TA)我酶切之后的质粒跑的比质粒快，是两条带能分出大小，这个质粒上有两个我用来线性化酶的酶切位点，所以我现在分不清这种情况是不是单酶切的结果。susizheng(站内联系TA)Originally posted by crab1983 at 2010-04-12 0944:我酶切之后的质粒跑的比质粒快，是两条带能分出大小，这个质粒上有两个我用来线性化酶的酶切位点，所以我现在分不清这种情况是不是单酶切的结果。 你用的是哪个载体？一般线性化都是选择单一的酶切位点进行单交换重组的，你要切下整个表达元件做双交换？那肯定是要做回收的。另外的话，根据maker应该知道哪条是你需要的带，然后回收就可以了。