将目的基因导入大肠杆菌需要先在体外构建基因表达载体?

用Ca2+处理转化的方法和这个方法是并列关系?

在体外构建基因表达载体主要是指将目的基因与载体(一般以质粒居多)连接,形成的重组DNA才能导入大肠杆菌,它能在大肠杆菌细胞内复制和表达。
用Ca2+处理,我学的是用Ca2+处理大肠杆菌的细胞壁,增大细胞壁的通透性,便于重组DNA分子导入大肠杆菌细胞。
所以这两个应该是同一个方法的两个步骤。
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...抗菌肽基因不能直接导入受体细胞,而是必须先构建基因表达载体?
如果只导入一个目的基因,进入宿主细胞是不能进行复制表达的,也不能长期保留。所以必须与载体结合,进入宿主细胞后才能与宿主细胞的DNA结合,才能保留和表达。

下列关于基因表达载体的叙述不正确的是 a其构建是基因工程的核心 b...
分析:基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取,②基因表达载体的构建,③将目的基因导入受体细胞,④目的基因的检测与鉴定.将目的基因转入大肠杆菌细胞:首先用钙离子处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(本质上是使细胞壁的通透性增加),这种细胞成为感受态细胞.第...

...A.构建基因表达载体是基因工程的核心B.通过基因工程育种
A、目的基因要靠运载体进入受体细胞,然后目的基因才能在受体细胞中表达,则构建基因表达载体是基因工程的核心;故A正确.B、基因工程技术可按照人们的意愿,克服生殖隔离,定向改造生物的遗传性状;故B正确.C、当目的基因导入受体细胞后,能否稳定维持和表达其遗传特性,还需要进行鉴定和筛选;故C错误.D...

为什么要先构建克隆载体再用表达载体
②测序需要。你想转表达,你首先得确定你扩增的目的片段是不是你要的,不要以为你设计了个特异性引物,然后跟你mark的长度就可以确定了,这也只是推测,在科学上不严谨。扩增出的基因片段保险起见或者经费允许,要拿去测序,而一般送测的序列都是构建到载体上的序列,克隆载体上一般也都带有测序引物,已...

高中基因工程操作的一般四个步骤
(2)目的基因与运载体结合:基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。 (3)将目的基因导入受体细胞:将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。目的基因的片段与运载体在生物体外连接形成重组DNA分子后,下一步是将重组DNA分子引入受体细胞中进行扩增。 (4)目的...

DNA重组技术是在体外的,那目的基因导入受体细胞,生物书上只说目的基因...
1.首先获取抗冻基因 2.其次构建基因表达载体 这两步都在体外进行,不详细介绍了 3.将目的基因导入受体细胞。此时涉及到你问的问题了。这个受体细胞我们需要的是受精卵,它的获取是在选取精子和卵母细胞,人工受精,活的受精成功的受精卵,(此处涉及胚胎工程和细胞工程的知识)显微注射法导入受体细胞 4....

将目的基因导入动物细胞时,为什么先将含有目的基因的
含有目的基因的表达载体在感染细胞之前,需要进行扩增,然后再提取载体.在这个过程中,载体经常会受到蛋白或者有机溶剂等的污染,而这些东西对于细胞是由毒害的,所以在感染细胞之前,要先除去载体中的这些杂质,就是纯化这一步.DNA(就是质粒载体)是溶解在水溶液或者buffer中的,然后与转染试剂混合,才能感染动物...

为什么外源基因不经过运载体直接导入大肠杆菌会被受体细胞中的限制性...
就好像别人往你体内注射细菌,你身体就会把外源的物质识别为抗原,产生免疫应答,将它消灭掉。外源基因也是这个道理,这是外来的,不被机体所承认的东西都会被视为有害的需要消灭的东西而被破坏掉。当外源基因重组在载体上,由于这种载体是细菌能够接受和识别的,所以会将它保留下来而不破坏它。逆转录病毒(...

外源基因连接T载体导入到大肠杆菌,那么外源基因能在
可以的,因为它上面有启动子。但是T载体一般不用做表达载体,因为它是靠T-A连接的(T载体上含多个T,PCR产物含多聚A),读码框未必正确,所以一般是用作中间过渡的载体,后续要把这段基因切下来(你的扩增引物上需要设计酶切位点,保证读码框正确),换到专门的表达载体去才行.

为什么重组质粒的形成是在细胞外完成?
质粒是最常用的运载体。而受体细胞之中没有质粒,当然就要先从大肠杆菌里提取出质粒,在体外构建表达载体,然后导入受体细胞。其次,要对质粒进行切割。如果在体内完成,那么怎么对质粒进行切割然后把目的基因插进去?根本行不通啊。所以说,表达载体的构建一定要在体外完成。操作方便。

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