高效液相色谱的原理及使用方法

如题所述

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。
使用方法:色谱柱的填料和流动相的组分应按各品种项下的规定.常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。
在用紫外吸收检测器时,所用流动相应符合紫外分光光度法项下对溶剂的要求。
正文中各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外,其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进 化学键合固定相反应
样量、检测器的灵敏度等,均可适当改变
以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求。一般色谱图约于20分钟内记录完毕。2.系统适用性试验
按各品种项下要求对仪器进行适用性试验,即用规定的对照品对仪器进行试验和调整,应达到规定的要求;或规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度和拖尾因子.
温馨提示:内容为网友见解,仅供参考
第1个回答  2021-04-15

如何使用高效液相色谱(HPLC)

高效液相色谱法原理
1、高效液相色谱法的原理是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测。2、高效液相色谱法有“四高一广”的特点:(1)高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大...

高效液相色谱的原理
总之,高效液相色谱是一种基于溶质在固定相和流动相之间分配平衡的色谱分析方法。通过优化色谱条件,可以实现对复杂样品中不同组分的有效分离和测定。高效液相色谱在化学、生物、医药、食品、环境等领域的应用,为科学研究、工业生产和社会发展提供了有力的技术支持。

高效液相色谱分离原理
高效液相色谱是一种分离技术,主要基于液体流动相与液体固定相之间的分配平衡。两种方法,液—液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography, LLPC)和化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography, GPC),都涉及试样在两相间的分配。LLPC和GPC的关键区别在于流动相对分离顺序的影响,LLPC流动...

高效液相色谱法的原理
高效液相色谱法是一种基于液体流动相在色谱柱内进行分离的技术。其原理主要包括:固定相、流动相、样品溶液中的分子在色谱柱内因亲和力不同而实现分离,经检测器检测后获得色谱图。详细解释 1. 色谱法基本原理 高效液相色谱法属于色谱法的一种,其核心在于通过固定相和流动相之间的相互作用实现物质的分离。

什么是高效液相色谱及其操作方法?
高效液相色谱利用色谱柱内的填料与流动相中的溶剂对样品进行分离。当样品溶液通过色谱柱时,各组分在固定相和流动相之间不断分配,达到平衡。由于不同物质在固定相和流动相中的分配系数不同,它们在色谱柱内的移动速度也会有所不同,从而实现分离。二、高效液相色谱的主要操作方法 1. 样品准备:样品需要...

高效液相色谱法原理
高效液相色谱法原理 答案:高效液相色谱法是一种基于色谱分离技术的分析方法,其原理主要是通过混合物中各组分的物理化学性质差异,在色谱柱中进行分离,然后通过检测器对分离后的组分进行检测和测量。详细解释:1. 色谱分离原理:高效液相色谱法的核心在于色谱分离。色谱柱内填充有固定相,当流动相中的混合...

高效液相色谱法的原理是什么?
高效液相色谱法的原理是基于色谱法的一种分离和分析技术。以下是详细的解释:一、色谱法基本原理 高效液相色谱法的基础是色谱法,它利用物质在固定相和移动相之间的吸附、溶解或分离等作用,实现物质的分离。固定相是色谱柱内的填料,移动相则是流经色谱柱的液体。样品在移动相中经过色谱柱时,不同的组分...

高效液相色谱仪的基本工作原理
1.色谱法的基本原理 色谱法是一种分离技术,通过物质在固定相和流动相之间的分配差异来实现分离。在高效液相色谱仪中,固定相通常是色谱柱中的填料或涂层,而流动相则是经过高压泵驱动在色谱柱中流动的液体。2.高效液相色谱仪的工作流程 高效液相色谱仪主要由进样系统、色谱柱、检测器以及数据处理系统...

请问HPLC是做什么的?原理?操作方法?
高效液相色谱的基本原理是使用液体作为流动相,并通过高压输液系统将流动相(通常是由不同极性的单一溶剂或混合溶剂、缓冲液等组成)泵入装有固定相的色谱柱。在色谱柱中,各组分根据其相互作用的不同而被分离,随后进入检测器进行检测,从而实现对样品成分的分析和分离。操作方法上,流动相储存在溶剂贮器...

高效液相色谱仪原理及操作步骤
1. 高效液相色谱仪原理 高效液相色谱法(HPLC)是一种广泛应用于分离、分析和纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机物)的有效方法。在已知的有机化合物中,约有80%能用高效液相色谱法分离、分析。由于此法条件温和,不破坏样品,因此特别适合高沸点、难气化挥发、热稳定性差的有...

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