rt-pcr△ct是负值怎么分析
将每一组样本每一个目的基因的△Ct都算好,整理进Excel,用本次实验中待研究样本的△Ct减去对照组样本的△Ct,并同时对所有结果取相反数,该步运算得到的结果就是-△△Ct。最后,对-△△Ct进行2的幂运算,即2^-△△Ct就得出Fold Change。
如何分析real-time PCR结果
目的基因:对照组1、对照组2、对照组3 实验组1、实验组2、实验组3 数据处理的时候,是先分别取内参、目的基因的三次平行实验的均值再拿相应均值相减得到 还有对于内参基因的数据,如果所得Ct 值差值在1 以内,是否可以将所有的内参取平均,另外对于这个REAL-TIME PCR 的结果除了用EXCEL 处理之外有没有其...
保姆级别qRT-PCR从理论知识(△Ct,△△Ct,2^-△△Ct)到实践操作
在实践中,qRT-PCR的每一步都需精确执行。以96孔板为例,合理的布板设计(表1)是关键。上样时,遵循试剂盒指示,包括引物、cDNA模板和ddH2O等(表2)。qRT-PCR的扩增程序包括变性、退火和荧光数据采集(表3),而溶解曲线的获取也是标准步骤。数据处理采用经典的2^-△△Ct公式(表4),Excel提供...
RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样...
1. 我认为你的引物浓度基本是合理的,而且引物浓度在一定范围内不会造成没有目的条带的现象。2.如果你是选用与外文文献相同的引物,可以参考他的反应条件,或者在他的退火温度上降低2-3度。3. 我觉得你的模板浓度已经不小了,我的PCR只用了30ng或者3ng。上述条件没给出扩增的循环数,建议查查文献,...