转基因植物有哪些分析鉴定方法

如题所述

分析、确定了75个品种的转基因构建成分,为开展转基因检测奠定了基础。

2、不同类型的植物提取基因组DNA的方法略有差异,该研究优化了CTAB、SDS快速提取法,并选择了磁珠吸附试剂盒法,成功提取了适合于PCR反应的植物基因组DNA。

3、以植物内源基因18SrRNA为靶标,设计、优化后筛选出特异性引物和探针,建立了以18SrRNA为目标的检测植物基因组DNA提取质量的PCR与荧光PCR鉴定体系。

4、首次以CaMV35S、FMV启动子、NOS终止子、标记基因NPTII、抗除草剂基因EPSPS、PAT、抗虫基因CryIAb为检测目标,设计、筛选出特异性引物,优化实验参数,建立了转基因植物PCR定性检测方法体系,灵敏度达0。

1﹪。

5、克隆了CaMV35S、FMV启动子、NOS终止子、标记基因NPTII、抗除草剂基因EPSPS、PAT、抗虫基因CryIAb的阳性质粒作为转基因植物检测的阳性对照。

6、于反应体系中引入UNG酶,建立了无污染的荧光PCR扩增体系。

7、首次以FAM荧光素标记探针5端作为发光基团,以TARMA标记探针3端为淬灭基团,以CaMV35S、FMV启动子、NOS终止子、标记基因NPTII、抗除草剂基因EPSPS、PAT、抗虫基因CryIAb为检测目标,设计、筛选出特异性引物和探针,优化实验参数,建立了转基因植物通用性荧光PCR定性检测方法体系。

8、以FAM和TET两种荧光素标记外源基因和内源基因,建立了转基因大豆抗除草剂基因EPSPS和转基因玉米抗虫基因CryIAb的荧光PCR定量检测体系,两体系的灵敏度均达到0。

1﹪以上。

9、首次利用反向PCR技术扩增出华番1号基因组未知DNA序列,并通过DNA测序,利用BLAST软件进行同源性比较,找出载体与基因组整合位点DNA序列。

10、利用荧光PCR技术,设计出特异性引物与探针,优化实验参数,建立了一种灵敏、精确、定量和鉴定华番1号品种特异性的高效检测体系。

这在国内为首次利用整合位点进行转基因植物检测和品种特异性鉴定的方法……
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转基因植物有哪些分析鉴定方法
3、以植物内源基因18SrRNA为靶标,设计、优化后筛选出特异性引物和探针,建立了以18SrRNA为目标的检测植物基因组DNA提取质量的PCR与荧光PCR鉴定体系。4、首次以CaMV35S、FMV启动子、NOS终止子、标记基因NPTII、抗除草剂基因EPSPS、PAT、抗虫基因CryIAb为检测目标,设计、筛选出特异性引物,优化实验参数,建...

转基因园艺植物鉴定的途径有哪些
方法如下:一是检测是否含有外源蛋白,即外源基因表达产物,主要采用酶联免疫吸附法和试纸条法;二是检测是否含有外源基因(DNA),主要有Southern杂交技术、基因芯片法和PCR检测法

植物转基因技术有哪些?
1. 植物转基因技术的方法包括农杆菌介导法、DNA直接插入法、花粉管通道法和植物病毒介导法。2. 农杆菌介导法是一种利用农杆菌转化受体细胞,将目标基因插入基因组的技术。这种方法研究广泛,机理清晰,且应用成熟。3. DNA直接插入法是指直接将外源基因插入植物基因组,无需质粒载体。4. 植物病毒介导法是...

如果有一株转基因植物出现了特异性的表型,如何判断是你转进去的基因所...
第三,表型鉴定。对转基因植物进行表型鉴定。甚至孟德尔遗传定律可以分析,是否表型是由于转基因造成,而不是环境造成的可逆表型。第四,不怕麻烦的话,可以针对转基因植物的转基因重新进行基因敲除或者基因编辑,观察性状是否改变。

转基因的植株要怎样检测?
有整合水平检测和表达水平的检测,基因整合检测方法主要有Southern杂交、PCR、PCR-Southern杂交、原位杂交和DNA分子标记技术法,表达水平的检测包括转录水平检测和翻译水平检测,转录水平的检测法有Northern杂交和反转录PCR(reverse:transcribed:PCR,RT-PCR)检测,翻译水平的检测有酶联免疫吸附法(enzyme:...

植物转基因技术有哪些,植物转基因技术的优缺点
一、植物转基因技术有哪些 1. 植物病毒介导法:利用病毒作为载体,将外源基因引入植物细胞。2. 农杆菌介导法:此方法研究深入,机理清楚,应用广泛,技术成熟。3. DNA直接插入法:包括脂质体法、聚乙二醇法(PEG法)和基因枪法等,直接将基因插入植物基因组。4. 花粉管介导法:操作简单,转化效率高,...

如何获得转基因植物? 如何用不同的方法检查现象?
1.基因文库或化学合成目的基因。2.农杆菌转化法或基因枪法或花粉管通道法将目的基因导入受体细胞。3.把受体细胞培养成植株。(具体操作不会可以继续提问)检查方法:1.DNA分子杂交,检验是否导入了目的基因。2.分子杂交技术,检验是否转录出相应mRNA。3.抗原-抗体杂交技术,检验是否翻译出相应蛋白质。4.进行...

转基因植物的筛选常用哪些方法?
1. 转基因植物的筛选方法众多,其中最为普遍的是通过农杆菌介导的遗传转化和基因枪转化技术。2. 不管采用哪种转化手段,成功转化的细胞总是少数,它们在与非转化细胞的竞争中处于劣势。3. 转化细胞作为异质细胞,其竞争力更弱,因此筛选转化细胞成为必要步骤。4. 在植物再生过程中,有些植株可能会规避...

如何筛选理想的转基因植物
根据转基因植物表达出的性状来筛选 1、抗虫的植物:用害虫接种,观察抗虫情况 2、抗病的植物:用病原体接种,观察抗病情况 3、抗旱植物:干旱处理 4、抗寒植物:低温处理 5、耐盐植物:盐碱地种植 6、高产、优质等植物,观察其产量或者产物品质。

如何鉴定转基因植物
这个首先要知道转基因是如何操作的,一般都是通过外源的植物表达载体将外源基因整合到植物基因组中,一般用到的载体上都会带有抗生素标记,比如卡那霉素,潮霉素等等;另外,表达外源基因需要有一段外源加入的启动子序列,一般有35S启动子以及一些组织特异表达启动子比如napin启动子;根据以上特点,可设计多对...

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