荧光PCR时ct值大于30？
现在在做荧光pcr，细胞的，12孔板，但是进行扩增时发现ct值大于30，一般在35左右，之后将循环数设置为60，才能见到完美的曲线，请教大家分析下出现的原因，附上溶解曲线和扩增曲线， 谢谢。我的猜测是cdna含量太低导致的，引物设计使用primer 6.0 长度在200bp。
其余 图片请大家移步 我的空间 这儿只能插入一张
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谢谢回复！！
再有，你的扩增曲线问题，CT太了，一般做定量认为CT=25时，是一个模板扩出来的，所以当大于25扩出来的结果都不可信。
还有，你反转录的时候RNA加多少，2微克？，反转录体系是多少,20微升？反转录之后按照多少比例稀释，1比4？
总之，问题可以再问详细一点，也可以直接HI我
如果做过NTC那溶解峰就没问题了，而且都很单一，特异性蛮好的。没稀释的cDNA做的定量，CT大于30？你P的什么基因呢，表达量也太低了吧，内参的CT呢，也是这么低吗
荧光PCR时ct值大于30?
看了你空间里的溶解曲线，你可以看到溶解峰的温度都很低，全在80以下，你扩出来的东西多半只是引物，你跑定量的时候有做NTC的孔吗，如果有做，可以对照NTC组和加了模板的组，溶解峰还是一样的话，那你扩出来的产物100%是引物了。再有，你的扩增曲线问题，CT太了，一般做定量认为CT=25时，是一个...
求解荧光定量PCR检测报告 检验项目 ct ct 值:∝ ct值标准:≥40 根据标 ...
荧光定量PCR检测的是样本中核酸含量，CT值反映的是样本中的核酸含量的浓度。1. 检测样本Ct值小于等于30.0，且曲线有明显的指数增长期，测定结果有效，可直接报告样本阳性；2. 检测样本Ct值大于30.0且小于40时，重复一次，如果Ct值仍小于40，且曲线有明显的指数增长期，可报告样本阳性，否则报告样本阴性...
实时定量pcr的CT值在什么范围内算作合理
通常情况下，我们认定为15到35CT比较合理，超过35个CT那么就算它没有扩增了，如果15之前起峰，那么就是模板浓度太高所引起的 在荧光定量PCR技术中，有一个很重要的概念 —— Ct值。C代表Cycle，t代表threshold，Ct值的含义是：每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数 ...
我要提问,我想请问的是荧光定量PCR检测支原体DNA,CT值27,39,结果呈阳...
一般来说，荧光定量PCR反应，CT值结果在18-24之间是比较好的结果，CT值大于24小于30左右也是可以接受的结果，CT值大于35以后基本可以认为该PCR反应没有扩增产物，你的实验结果27的那个CT值还可以用，39的那个说明根本就没有扩增产物，你可以从溶解扩增曲线上看一下，如果实在不放心可以把PCR产物跑一个琼...
...没有出现二聚体 但是为何目的基因的ct值大于30 ,在31左右。_百度知...
因此，可能你稀释倍数越低，最后反而realtime反应的扩增效率越低，你可以尝试把稀释倍数高一些试试看，因为当时我在做实验的时候确实在丁香园上看到有的战友提到过这样的问题，如果再有问题我们可以再讨论，大家一起提高，希望能帮到你。如果回答对您有用，请及时采纳。
奥密克戎检测tc大于30好还是小于30毫
奥密克戎检测tc大于30好还是小于30毫：一是复阳者绝大多数CT值是大于35的，大概不到5%的复阳者核酸的CT值是小于30，即便是这部分不到5%核酸CT值小于30的也没有培养出病毒。二是PCR检测（聚合酶链反应）没有检测出完整的病毒基因，只有病毒的片段，也就是说它不是活病毒，是没有传染性的。
荧光定量PCR Ct值很高,都是30几,怎么办
看了你空间里的溶解曲线，你可以看到溶解峰的温度都很低，全在80以下，你扩出来的东西多半只是引物，你跑定量的时候有做NTC的孔吗，如果有做，可以对照NTC组和加了模板的组，溶解峰还是一样的话，那你扩出来的产物100%是引物了。 再有，你的扩增。
最近RT-PCR,没有目的条带,但是孔很亮,连引物二聚体也没有,但是marker正 ...
有扩增曲线的话，CT值不是太高在20～30之间属于正常（40个循环）。如果连曲线都没有的话就是扩不出来。如果曲线什么都正常的话，建议重新配制一块符合自己目的条带大小的琼脂胶重新电泳。
实时荧光定量PCR的结果该怎样分析?
3、引物或探针降解：可通过PAGE电泳检测其完整性；4、模板量不足：对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起；5、看CT值是分析荧光定量PCR最直观的一个数据，CT值一般在35左右就失去参考价值了，平时我们实验室用BIODAI-PCR荧光定量法测得的扩增曲线的起跳值基本在30左右。
非洲猪ct值20～30正常吗
正常。在荧光定量PCR与抗体检测分析中，CT值是反映病毒载量和抗体水平的重要指标，非洲猪的CT值在20到30之间属于正常范围，这表明没有非洲猪瘟病毒感染和抗体水平正常，从而有效保障了猪的健康与养殖业的稳定。
