获得途径：1限制性内切酶酶切法2利用PCR技术直接扩增目的基因3目的基因的化学合成4通过构建基因组文库或CDNA文库分离目的基因5反向转录法分离目的基因
目的基因导入受体细胞：原核生物最理想受体细胞：大肠杆菌、枯草杆菌、蓝藻、棒状杆菌。真核生物应用最广的受体细胞：酵母细胞
途径：1电穿孔法2基因枪法3激光微束穿孔法4显微注射法5多聚物介导法6脂质体介导转化法
克隆子的筛选鉴定:克隆子的筛选方法：1根据载体选择标记基因2根据报告基因
3根据PCR扩增片段4根据限制性核酸内切酶图谱分析5采用DNA杂交法6应用DNA芯片7DNA核苷酸序列测定
如何从基因文库中获取目的基因
如何从基因文库中获取目的基因?
获得目的基因的方法：一、构建基因文库 提取总DNA。用限制性内切酶将总DNA切成小片段，连到质粒或噬菌体载体上，把这些质粒转化到细菌，随着细菌繁殖而复制，这个过程又称为基因克隆（gene clone）将总DNA包含的基因组各片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上，便构成了该生物的基因文库（gene library）。二、...
基因文库 从基因文库中提取基因
有了基因文库，获取目的基因可以通过下面三种方法.1.可以通过碱基序列人工合成,2.通过特定的限制性内切酶将目的基因剪切下来,3.可以用mRNA通过逆转录合成目的基因.为了筛选真核生物的某种基因，常从它的转录产物mRNA经反向转录（见中心法则）合成相应的互补DNA(cDNA)，再加入用32P标记的核苷三磷酸，用DNA多...
用什么方法从基因文库中获得目的基因
1.从基因文库中获取 这个没什么就是现成的基因储存在受体菌上你用的时候提取出来就好了（基因组文库法 就是原教材中的用限制性内切酶直接获取.利用λ噬菌体载体构建基因组文库的一般操作程序如下：① 选用特定限制性内切酶,DNA进行部分酶解,得到DNA限制性片段② 选用适当的限制性内切酶酶解λ噬菌体载体DNA....
如何提取目的基因?
1.从基因文库中获取目的基因（俗称：鸟枪法）：将含有某种生物的许多DNA片段,导入受体菌 的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物不同的基因,称为基因文库.当需要某一片段时,根据目的基因的有关信息,如根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因 在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA,以及基因的表达产物蛋...
怎样从基因文库中找出目的基因
用DNA探针从基因文库中准确提取目的基因，由于DNA双链的核苷酸序列是彼此互补的，当DNA分子杂交时，首先是双链解开（该过程称为变性），根据所需基因的核苷酸序列制成一段与之互补的核苷酸短链，并用同位素标记，即成为探针。用这一探针探查基因文库中已经变性的DNA片段，如果有一个DNA片段能和探针片段互补...
如何从基因文库中找到所需要的基因
从基因文库中找到目的基因是一件比较复杂的事情，要根据目的基因已有的某些信息来进行。下面介绍一种根据基因的部分核苷酸序列找到目的基因的方法。第一步，通过PCR方法将目的基因已知的部分核苷酸序列扩增出来，进行放射性同位素标记（也可以用别的标记方法进行，如生物素、荧光素等），即用标记了放射性同位素...
如何从基因文库中获取目的基因不需要模板
从基因文库中筛选某一克隆的常用办法是分子杂交.首先把属于一个文库的细菌或噬菌体以较低密度接种在培养皿上以取得相当分散的菌落或噬菌斑,然后用硝酸纤维滤膜吸印,使培养皿和滤膜的相对应的位置上具有相同的克隆.同时另行制备供分子杂交用的探针.为了筛选真核生物的某种基因,常从它的转录产物mRNA经反向...
从基因文库中获取目的基因的根据是
根据就是基因文库是对某一物种基因组进行覆盖而构建的文库，文库一定包含所需的目的基因。方法是：1.从供体中制备高纯度的染色体基因组DNA；2.用合适的限制酶把DNA切割成若干个片段；3.将这些片段分别与适当的载体分子进行体外连接；4.重组载体导入受体细胞中或包装成噬菌体，适宜条件下培养；5.观察培养...
基因组DNA文库要怎样分离目的基因?
基因文库的构建是目前基因工程的核心工作，也是分离目的基因的常用方法之一。首先，将某生物体的全部基因组DNA用限制性内切酶或机械方法切割成大小合适的片段，并将这些片段与适当的载体进行体外重组；再引入到相应的宿主细胞中繁殖和扩增，从而获得所有阳性菌落，从理论上讲，这些重组子应包含有整个基因组DNA...
怎样从基因文库中找出目的基因
获取目的基因的方法是：1从基因文库中获得。目的基因片段的获取：目的基因的组成：一个能转录翻译的结构基因应包括转录启动区、核糖体识别区、编码区、和转录终止区。获得途径：1限制性内切酶酶切法2利用PCR技术直接扩增目的基因3目的基因的化学合成4通过构建基因组文库或CDNA文库分离目的基因5反向转录法分离...
