如何利用PCR技术鉴定转基因植物

如题所述

利用PCR技术鉴定转基因植物的方法如下:
1. 准备阶段:提取植物细胞的基因组DNA。
2. 设计特异性引物和探针:针对转基因植物中插入的外源基因(如CaMV35s启动子和NOS终止子),设计特异性引物和探针。
3. 进行PCR扩增:将设计好的引物和探针加入到PCR反应体系中,对DNA模板进行扩增。
4. 荧光检测:在PCR扩增过程中,探针会与目标序列结合并发出荧光信号。通过荧光检测系统对荧光信号进行监测,可以得到PCR扩增结果的曲线图。
5. 结果分析:根据扩增曲线图,可以判断转基因植物中是否含有目标序列。如果曲线图显示明显的荧光信号,说明转基因植物中包含目标序列;如果曲线图没有荧光信号,说明转基因植物中没有目标序列。
6. 验证:为了验证结果的准确性,可以通过芯片式数字PCR或微滴式数字PCR等方法,对PCR扩增产物进行进一步的分析和验证。
温馨提示:内容为网友见解,仅供参考
第1个回答  2012-05-16
这是选修3专题的知识,不要求掌握,因为我也高2。但是可以了解哈,
大概是这样的, 从转基因植物体细胞中,取出样本核酸。 在PCR中用来鉴定的核酸用荧光蛋白,或者同位素标记。然后将样本放入PCR中,进行扩增。
注意哦,PCR里面的标记好的核酸,都有唯一对应的碱基对,这碱基对,是我们理论上的,所以肯定知道的。如果转基因成功了,那么PCR扩增就会进行的很顺利,且产物越来越多,荧光素浓度越来越大,这样避免了假阳性,很准的。
如果失败了,荧光素浓度基本不变。肯定没戏啦。
不懂问我,我高2.就了解这些吧,考点不在这哦!
第2个回答  2012-05-16
从转基因植物体细胞中,取出样本核酸。 在PCR中用来鉴定的核酸用荧光蛋白,或者同位素标记。然后将样本放入PCR中,进行扩增。
注意哦,PCR里面的标记好的核酸,都有唯一对应的碱基对,这碱基对,是我们理论上的,所以肯定知道的。如果转基因成功了,那么PCR扩增就会进行的很顺利,且产物越来越多,荧光素浓度越来越大,这样避免了假阳性
第3个回答  2012-05-19
根据目的基因设计引物,然后提取植物基因组DNA,进行扩增,看能够扩到目的基因

转基因植物鉴定方法
9、首次利用反向PCR技术扩增出华番1号基因组未知DNA序列,并通过DNA测序,利用BLAST软件进行同源性比较,找出载体与基因组整合位点DNA序列。10、利用荧光PCR技术,设计出特异性引物与探针,优化实验参数,建立了一种灵敏、精确、定量和鉴定华番1号品种特异性的高效检测体系。一些人问:植物转基因有害吗 转基因...

如何用qpcr计算转基因植物拷贝数
鉴定转基植物第步要确定转基已经稳定整合染色体第二步任务评估少转基拷贝及每转基表达水平何般经游表达载体设计构建及游转化体系建立、转化品系筛选鉴定等系列步骤即获 T 0 代转基植物转化程外源 DNA 随机插入植物基组内插入拷贝数位点都固定插入外源基拷贝数低(1或2)能较表达插入拷贝数则导致表达稳...

植物转基因技术有那些步骤和流程?
利用聚合酶链反应(PCR)技术,能够从原生物的基因组中精确地克隆出所需的基因片段。2. 载体构建:接下来,将目的基因通过特定的酶连接到质粒分子上,形成一个含有目的基因的新质粒分子。3. 转化:在这一步骤中,通常使用农杆菌作为载体将基因转移到植物细胞中。农杆菌能够侵染植物细胞,并促进细胞分裂,...

植物转基因技术有那些步骤和流程?
一、基因克隆必须得有这个需要被转的基因。现在最广泛使用的BT蛋白基因和抗草甘膦基因,就来自于两种细菌。因此,细菌来源的基因,也可以在植物中起作用。通过序列比对和分析,并加上如今丰富的基因组数据库,我们可以很容易的找到和确定目标基因的序列。然后,利用最常用的PCR手段,就能将我们所需的基因...

如何鉴定转基因植物
这个首先要知道转基因是如何操作的,一般都是通过外源的植物表达载体将外源基因整合到植物基因组中,一般用到的载体上都会带有抗生素标记,比如卡那霉素,潮霉素等等;另外,表达外源基因需要有一段外源加入的启动子序列,一般有35S启动子以及一些组织特异表达启动子比如napin启动子;根据以上特点,可设计多对...

转基因农作物制备步骤
1. 目的基因克隆:首先,通过序列比对和分析确定目标基因,随后使用PCR技术从生物体的基因组中提取并复制出目的基因。2. 载体构建:接下来,将目的基因通过特定的酶切技术连接到质粒DNA上,形成一个载体,该载体能够将目的基因插入到植物细胞中。3. 遗传转化:转化过程中,可采用多种方法,如农杆菌介导的...

怎么用荧光定量pcr鉴定转基因纯合子
芯片或差显结确证 3. 基型:例SNP 检测甲基化检测等 Realtime PCR 用两种别:Sybr green(荧光染料掺入) Taqman probe (探针) SYBR green PCR反应体系加入量SYBR荧光染料SYBR荧光染料特异性掺入DNA双链发射荧光信号掺入链SYBR染料发射任何荧光信号保证荧光信号增加与PCR产物增加完全同步 适用: ...

转基因大豆检测技术
实时荧光定量PCR技术凭借其高灵敏度和快速性,不仅能够进行定性检测,还能够进行定量分析,成为当前转基因检测的主流趋势。然而,全球范围内并未建立起统一的植物油转基因检测标准,这是当前亟待解决的难题。未来,对食用大豆油转基因成分的定量检测将是一个重要发展方向,这无疑对检验人员的专业技能提出了更...

获得植物转基因植物需要哪些步骤
1. 基因克隆:首先,必须确定并提取所需转基因的基因,例如BT蛋白基因或抗草甘膦基因,这些通常来源于细菌。利用现代分子生物学技术,如聚合酶链反应(PCR),可以精确地从生物体的基因组中复制目标基因片段。2. 载体构建:接下来,将提取的目的基因通过特定的酶连接到质粒DNA上,形成一个含有目的基因的...

转基因的植株要怎样检测?
因此,必须采用一定的检测方法,才能筛选和鉴定出含有目的基因的重组体。目前已发展出一系列的转基因植物的筛选和鉴定方法。在这些鉴定和筛选方法,根据检测的基因功能来划分,可分为调控基因(包括启动子终止子等)检测、选择标记基因检测和目的基因直接检测。根据检测的不同阶段区分,有整合水平检测和表达...

相似回答